Technique 1 | Technique 2 | Technique 3 La neurotensine (NT) est un neuropeptide de 13 acides aminés, pyroglutamylé au niveau du résidu d'acide glutamique 1, et de formule : pGlu - Leu - Tyr3 - Glu - Asn - Lys - Pro - Arg - Arg - Pro - Tyr11 - Ile - Leu13 Technique 3 - Iodation de la NT par le réactif de Bolton-Hunter : Cette troisième technique utilisée pour obtenir un analogue radiomarqué de la NT fait appel au réactif de Bolton-Hunter. Rappel : Le réactif de BH réagit avec les amines en positions a et e. Or la NT présente un résidu de lysine en position 6 : pGlu - Leu - Tyr - Glu - Asn - Lys - Pro - Arg - Arg - Pro - Tyr - Ile - Leu13 S’il y a réaction au niveau de la Lys6 (réaction favorisée à pH 8,5) l'analogue obtenu perd un facteur 5 dans l’affinité pour les récepteurs de la NT. Il faut donc se débrouiller afin de ne pas toucher à celle lysine. Deux approches sont utilisées : - Transformation du résidu pGlu1 en Glu par une activité enzymatique de type pyroglutamyl aminopeptidase, ce qui va libérer la fonction NH2 en a. A ce moment là, il sera possible de faire réagir le peptide avec le réactif de Bolton-Hunter. La réaction sera favorisée en a en se plaçant à pH 7. Le radioligand obtenu sera de la 125I-BH-Glu1-NT. - Utilisation du peptide de synthèse : la NT (2-13). Ce peptide présente exactement la mme affinité que la NT native pour ses récepteurs. Le réactif de BH pourra réagir sur la Leu2 (cette réaction sera favorisée en se plaçant à pH 7). Le radioligand obtenu sera de la 125I-BH-NT (2-13). Retour vers la partie 2. © jmb - 2000. Pour toute utilisation des données présentées ici, merci de me contacter.
