Cette technique permet de manière rapide et aisément, d'étudier si un ligand est capable d'activer un RCPG donné, à condition que ce récepteur soit cloné et qu'il active la phospholipase C en tant qu'effecteur.  Le schéma ci-dessus résume cette technique : L'injection d'ADNc, d'ARNc ou bien d'ARNm directement dans l'ovocyte (1-2 mm de diamètre) de xénope (qui est un crapaud), à l'aide d'un capilaire en verre, finement étiré, permet l'expression de la protéine codée par l'acide nucléique injecté. Si l'on applique à la surface de cet ovocyte, maintenu dans un tampon physiologique, il est possible d'observer une réponse électrophysiologique, qui sera un courant chlorure sortant, par l'intermédiaire d'une conductance chlorure dépendante du calcium. Le récepteur exprimé à la surface de l'ovocyte, stimulé par un ligand spécifique, va activer une protéine-G intrinsèque à l'ovocyte, et ainsi augmenter l'activité de la phospholipase C. L'IP3 produit entraîne un relargage d'ions calcium à partir de réserves intracellulaires. Le calcium active la conductance chlorure dépendante du calcium. |